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Diagnostic de laboratoire de la tuberculose

La tuberculose est une maladie infectieuse causée par une mycobactérie. Affecte le plus souvent le système respiratoire, mais peut se propager à d’autres tissus et organes. La voie de transmission la plus courante est aérienne. Pour que la forme active de la maladie se développe, des conditions favorables sont nécessaires, par exemple une immunité réduite.

La pathologie se manifeste par une toux prolongée, une température subfébrile pouvant persister plusieurs mois, des sueurs nocturnes et une lymphadénopathie. Les schémas thérapeutiques modernes vous permettent de vous débarrasser de la maladie. Cependant, cela nécessite un diagnostic rapide. Au début, la tuberculose peut ne pas provoquer de symptômes cliniques, le diagnostic doit donc être préventif et régulier. Une thérapie précoce vous permet de vous débarrasser des complications, y compris les troubles structurels prononcés du système respiratoire et la propagation secondaire de l’infection.

Méthodes modernes de diagnostic de la tuberculose

Il existe les méthodes suivantes pour diagnostiquer la pathologie:

analyse bactériologique de l’urine;

test sanguin biochimique;

méthodes de diagnostic microbiologique;

étude du système de coagulation;

analyse microscopique des crachats;

méthodes de faisceau de diagnostic.

Considérons ces méthodes plus en détail.

Analyse bactériologique des urines

Il est indiqué pour la tuberculose extrapulmonaire. Cette méthode de diagnostic est extrêmement importante, car la tuberculose du système génito-urinaire entraîne souvent des complications et ne provoque pas de symptômes pendant longtemps. C’est la tuberculose qui peut se faire passer pour un processus inflammatoire ou une lithiase urinaire pendant longtemps. Par conséquent, une pathologie à long terme de ces organes, difficile à traiter, est une indication pour le diagnostic. En outre, l’analyse d’urine est indiquée pour la tuberculose afin d’exclure l’implication du système génito-urinaire dans le processus.

Afin de déterminer la présence de l’agent pathogène dans l’urine, une bactérioscopie ou un ensemencement sur le milieu est effectué.

Pour détecter les mycobactéries, une coloration spéciale est effectuée, dans laquelle l’agent pathogène acquiert une teinte différente, différente des cellules saines.

Une autre méthode consiste à inoculer un échantillon d’urine sur un milieu nutritif. S’il y a une augmentation de la culture de mycobactéries, cela indique la présence d’un agent pathogène dans le corps.

Analyse d’urine générale

Dans l’analyse générale de l’urine, des changements caractéristiques sont observés dans la tuberculose. Il s’agit de l’apparition de gouttes de pus, de la présence ou de traces de protéines et d’une réaction plus acide. Des leucocytes modifiés, des bactéries, des érythrocytes apparaissent également.

Chimie sanguine

À certains stades de la maladie, des modifications du test sanguin biochimique sont détectées. Dans la forme inactive, il n’y a pas de changement dans ces analyses, bien qu’elles puissent apparaître avec une pathologie concomitante.

La forme aiguë de la tuberculose entraîne une diminution du coefficient albumine-globuline. Si la pathologie a entraîné des complications sous forme de lésions hépatiques, le taux de transaminases et de différentes fractions de bilirubine augmente. Ces indicateurs sont inclus dans l’examen obligatoire d’un patient atteint de tuberculose. Le patient passe cette analyse en dynamique, pour évaluer l’état.

La détérioration de la fonction rénale peut se traduire par une augmentation de la créatinine, des modifications du taux de filtration glomérulaire.

Un test sanguin biochimique n’a pas de valeur diagnostique spécifique, mais est un élément important dans l’évaluation de la qualité du traitement et de l’état du patient.

Les méthodes de diagnostic immunologique comprennent la méthode T-SPOT.TB . La base de la méthode est d’étudier la réaction des lymphocytes T. La procédure est très sensible et très informative. Les faux résultats sont exclus même lorsque les autres méthodes sont insensibles au résultat. La méthode est utilisée dans les cas douteux, par exemple après les vaccinations, chez les patients atteints de pathologie auto-immune, chez les agents de santé. Cette méthode permet d’évaluer quantitativement la présence de l’agent pathogène, mais ne fournit pas d’informations sur la phase du processus.

Ce diagnostic occupe une place particulière chez les porteurs du VIH . Le fait est que le virus infecte les lymphocytes. Malgré cela, les diagnostics utilisant la méthode T-SPOT.TB donnent des résultats précis.

La grande précision du test s’explique également par le fait que le système de test est sensible aux composants de l’agent pathogène, mais précisément à ceux qui ne sont présents ni dans le vaccin BCG ni dans d’autres micro-organismes ayant des composants similaires. L’essence de la méthode est de quantifier les lymphocytes T effecteurs (CD4 et CD8) dans le sang qui produisent l’IFN-ɣ (interféron gamma), qui est produit en réponse à la stimulation avec des antigènes ESAT-6 et CFP10 spécialement sélectionnés. C’est l’un des fragments du génome des mycobactéries. Il est à noter qu’une spécificité élevée est observée à la fois dans la phase latente et dans la phase active.

Une préparation spéciale pour le test n’est pas nécessaire – il suffit de limiter la prise de nourriture deux heures avant la procédure. Un prélèvement de sang veineux est effectué. Cela doit être fait dans des conditions appropriées, dans le respect des règles d’asepsie et d’antisepsie.

Un résultat de test positif indique qu’une mycobactérie est présente dans le corps, et un résultat négatif indique le contraire.

Méthodes de diagnostic microbiologique

Ils sont utilisés pour la détection directe de l’agent causal de la tuberculose dans les tissus biologiques du corps. Diverses techniques sont appliquées.

La coloration de Ziehl-Nelsen consiste dans le fait qu’un frottis avec la préparation est traité avec un colorant spécifique. Les mycobactéries acquièrent une teinte caractéristique, ce qui indique que la réaction s’est produite. Ainsi, vous pouvez confirmer ou exclure la présence de l’agent pathogène dans le matériau. La méthode est économique et relativement rapide. Cependant, il n’est sensible qu’à des concentrations élevées de micro-organismes dans l’échantillon.

La microscopie à fluorescence donne une résolution plus élevée et améliore la technique de coloration. Cela nécessite l’utilisation de fluorochromes – des substances spécifiques qui «éclairent» les mycobactéries et les rendent plus visibles au microscope.

L’amplification en chaîne par polymérase permet de reproduire l’ADN d’une bactérie à partir de ses fragments, contenus dans les tissus. Il s’agit d’une méthode de diagnostic rapide et informative qui présente une spécificité et une sensibilité élevées.

La méthode culturale consiste à cultiver une culture de mycobactéries. Pour cela, un fragment du biomatériau est prélevé et ensemencé sur un milieu nutritif. Ensuite, la souche qui s’est développée sur le milieu est évaluée et le diagnostic est confirmé ou exclu. Un milieu spécifique est utilisé qui est plus susceptible de faire croître le milieu requis. Les colonies cultivées peuvent être utilisées pour déterminer la sensibilité aux antibiotiques.

VASTEC460 est une méthode de diagnostic moderne qui utilise un système radiométrique et étiqueté CO2. La bactérie absorbe l’élément indicateur et peut être détectée dans le matériel de test.

Étude du système de coagulation sanguine

Un coagulogramme est souvent utilisé en phthisiologie, car les patients atteints de tuberculose développent progressivement une hémoptysie ou une hémorragie pulmonaire. Cela entraîne une modification de l’hémostase. L’analyse peut également changer après le traitement chirurgical de la maladie.

Le contrôle du coagulogramme est basé sur l’analyse d’indicateurs tels que l’APTT, le fibrinogène, le temps de saignement, le temps de coagulation. Ces chiffres peuvent fluctuer dans différentes directions, en fonction de la quantité de sang perdu. S’il est insignifiant, le système de coagulation est stimulé et les performances augmentent. La perte d’un grand volume de sang entraîne une diminution des facteurs de coagulation dans le corps et des modifications correspondantes du coagulogramme.

Analyse microscopique des crachats

L’analyse des expectorations est un test obligatoire pour la tuberculose. Avec cette pathologie, les expectorations sont sécrétées en petite quantité, entrecoupées de sang, de pus, de mucus. Dans les premiers stades, le sang peut ne pas apparaître. La forme caverneuse de la maladie entraîne l’apparition de corps dits de riz dans le matériau. En outre, il existe des inclusions de cristaux, de fibres élastiques, de cholestérol. Augmentation des protéines dans la composition totale des expectorations. Si une carie s’est produite, les crachats contiennent du calcium, des fibres d’origines diverses, du cholestérol et, en fait, des mycobactéries de la tuberculose.

La bactériologie des expectorations est également réalisée. Une méthode de coloration spécifique est utilisée pour déterminer la présence de mycobactéries. Les cultures sur milieux nutritifs ont également une valeur diagnostique.

La bactérioscopie des crachats implique son étude sous le grossissement nécessaire du microscope. À forte concentration de micro-organismes, la technique est assez spécifique et sensible. Les crachats sont examinés 3 fois afin d’obtenir le résultat le plus précis.

Méthodes de diagnostic des rayonnements

Les méthodes de rayonnement vous permettent de visualiser les changements dans le corps, qui ont conduit à des mycobactéries. Il s’agit à la fois d’une méthode de diagnostic de dépistage et d’une méthode d’évaluation de la gravité et du degré de pathologie. En outre, le diagnostic radiologique est une méthode d’évaluation dynamique du patient. Il existe de telles techniques de radiothérapie dans le diagnostic de la tuberculose:

  • fluorographie;
  • radiographie;
  • tomographie;
  • études radio-opaques.

La fluorographie est utilisée pour les diagnostics de dépistage, ce qui nécessite une confirmation en cas de résultats suspects. Une méthode non spécifique qui est utilisée pour l’examen préventif. La technique numérique vous permet d’évaluer l’image sur l’écran en utilisant le grossissement et l’approximation de l’image. La méthode est simple, rapide et économique.

La radiographie est une technique plus précise et vous permet d’examiner complètement les structures de la poitrine. sur la photo, vous pouvez détecter des signes de défaillance fonctionnelle de divers organes, tracer la topographie du néoplasme, diagnostiquer une cavité, une atélectasie, un abcès ou une violation de l’intégrité de la cavité pleurale. Effectué en deux projections pour des résultats plus précis. Parfois, des diagnostics ciblés sont utilisés.

La tomographie est la méthode la plus précise pour visualiser les structures de la poitrine. C’est la formation d’images en couches d’organes et de structures. Vous pouvez déterminer la propagation et la localisation du foyer de la maladie, voir quels tissus elle a touchés et à quelle profondeur elle a pénétré.

Des techniques utilisant le contraste sont utilisées pour obtenir une image de l’arbre bronchique (bronchographie). Vous pouvez détecter des modifications de la cavité, une altération de la fonction de drainage, des modifications structurelles et la présence de fistules. L’angiopulmonographie est également utilisée. le produit de contraste est injecté dans le lit vasculaire et permet d’évaluer le débit sanguin pulmonaire. ceci est particulièrement important pour l’hémoptysie et les saignements.

Les méthodes radionucléides, la scintigraphie sont utilisées. Ils sont utilisés pour évaluer l’activité ou la déficience fonctionnelle.

La technique de l’échographie est utilisée pour évaluer l’activité du cœur, diagnostiquer l’état des sinus pleuraux, des ganglions lymphatiques.

Collecte de matériel et préparation à la recherche

Une portion du matin est utilisée pour tester l’urine pour la tuberculose. il est nécessaire d’effectuer la toilette des organes génitaux externes et de ne pas toucher le réservoir de collecte de matériel avec eux. Le récipient doit être stérile et sec. Le biomatériau collecté doit être livré au laboratoire dans les plus brefs délais, pour éviter son dessèchement et son échauffement. Un jour avant le test, vous devez abandonner les produits tels que les myrtilles, les carottes, les betteraves et autres légumes et fruits brillants. Vous devez également limiter la consommation de diurétiques, de vitamines, d’acide acétylsalicylique. Les femmes doivent se rappeler que les tests d’urine ne sont pas effectués pendant la menstruation. Une portion moyenne et intermédiaire d’urine est administrée.

Le don de sang a lieu à jeun, car manger peut fausser les résultats de l’étude. Il vaut la peine de consulter votre médecin au sujet du retrait de certains médicaments. La veille, vous ne devez pas utiliser de café, d’alcool, de tabac. Le prélèvement sanguin s’effectue dans des conditions stériles, dans le respect des règles de prélèvement du matériel. Certains tests nécessitent du sang capillaire, tandis que d’autres nécessitent du sang veineux.

Les crachats sont recueillis à jeun, dans le respect des règles de base. Le matériau doit être craché afin que le mucus de la bouche ou du nasopharynx ne pénètre pas dans la vaisselle. Un crachoir spécial en verre foncé avec un couvercle étanche est utilisé. Les crachats ne doivent pas être altérés ou secs.

Les méthodes de recherche instrumentale ne nécessitent pas de préparation particulière. Une exception est l’utilisation d’un agent de contraste. Avant de l’utiliser, il est nécessaire d’évaluer la fonction des reins. La plupart des substances radio-opaques sont excrétées par ces organes et le médecin doit être sûr que le système excréteur résistera à cette charge.

Normes et écarts détectables

Normalement, il ne devrait pas y avoir de mycobactéries dans le corps. Leur présence est considérée comme un résultat positif du diagnostic de tuberculose. Un résultat négatif indique que le patient n’a pas cette pathologie. Certaines méthodes sont non spécifiques et n’ont pas une grande valeur diagnostique. Ils sont utilisés pour évaluer l’état général. Les méthodes bactériologiques sont plus spécifiques et leurs résultats positifs peuvent être considérés comme une confirmation du diagnostic. Un résultat négatif est une raison pour des tests répétés s’il y a des signes cliniques de la maladie.

Dates limites pour la disponibilité des résultats de diagnostic de la tuberculose

L’analyse générale et biochimique du sang, des expectorations et de l’urine peut être prête en quelques heures. En règle générale, les résultats sont communiqués le lendemain.

La méthode bactériologique avec coloration prend environ 24 heures.

Les cultures prennent plus de temps – jusqu’à plusieurs semaines.

Le résultat des méthodes de diagnostic par rayonnement dépend de la vitesse de description de l’image. Le plus souvent, cela prend environ une journée.

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Analyse générale des crachats

Une analyse générale des expectorations est une étude en laboratoire des sécrétions pathologiques formées dans les poumons, les bronches et la trachée.

Types de tests d’expectoration

Une analyse générale des expectorations comprend plusieurs études, dont chacune a une signification indépendante.

Le diagnostic comprend :

  • inspection des sécrétions;
  • établir leur nombre;
  • détermination de la couleur, de la transparence et de la viscosité ;
  • microscopie;
  • bactérioscopie;
  • culture bactériologique;
  • étude de la composition cellulaire.

La portée de l’étude et la liste précise des paramètres à déterminer dépendent de l’état du patient et du diagnostic proposé. Ainsi, un ensemencement bactériologique et une étude cytologique détaillée ne peuvent pas toujours être utilisés. Le médecin de la direction indique les indicateurs qui l’intéressent. Chaque paramètre de l’examen des crachats change différemment selon les maladies.

L’analyse clinique générale des crachats détecte tout d’abord les micro-organismes pathogènes, dont le plus important est la mycobactérie ou l’agent causal de la tuberculose. Des cellules tumorales malignes, un mélange de pus ou de sang peuvent également être détectées, ce qui indique également des maladies bien définies. Si des micro-organismes pathogènes sont détectés, leur sensibilité aux antibiotiques et aux bactériophages est immédiatement établie, ce qui permet au médecin de prescrire le traitement le plus efficace.

L’examen microscopique est un examen sous fort grossissement de la décharge des voies respiratoires. Pour une meilleure distinction, les préparations sont colorées.

Maladies pour lesquelles un test général d’expectoration est prescrit

Une personne en bonne santé ne produit pas de mucus. Normalement, les voies respiratoires produisent une petite quantité de sécrétion, qui est avalée sans être remarquée par une personne. La composition du secret normal comprend des cellules épithéliales desquamées, des immunoglobulines, d’autres protéines et des éléments cellulaires, principalement des lymphocytes. La sécrétion bronchique est nécessaire à l’élimination des petites particules inhalées avec de l’air. Un tel mécanisme est nécessaire à la purification naturelle du système respiratoire.

Avec toute maladie, ainsi qu’avec le tabagisme, la quantité de mucus produite par les voies respiratoires augmente considérablement. Il doit être retiré par expectoration. Par conséquent, la principale indication d’une telle étude est la présence d’expectorations.

Les crachats peuvent contenir des bactéries pathogènes, des virus, des cellules cancéreuses, des éléments formés et des objets tombés accidentellement de la cavité buccale. C’est une sorte d’empreinte de ces processus dont souffre le système respiratoire.

Les expectorations pour l’examen clinique général sont collectées pour ces maladies:

  • bronchite – inflammation de la paroi bronchique;
  • pneumonie – inflammation du tissu pulmonaire;
  • asthme bronchique – une réaction allergique des bronches avec bronchospasme;
  • tuberculose pulmonaire – une maladie infectieuse causée par la baguette de Koch;
  • la coqueluche est une infection principalement infantile causée par bordetella ;
  • bronchectasie – expansion locale de la paroi bronchique (les expectorations stagnent dans la cavité formée);
  • tumeurs du système respiratoire;
  • invasion helminthique – échinococcose, etc.;
  • infection fongique – actinomycose, etc.;
  • La silicose est une pathologie professionnelle qui se développe avec l’inhalation prolongée de composés de silicium.

Sans faute, l’étude est réalisée en présence d’une toux avec expectoration, ainsi que de données radiographiques suspectes ou de données pathologiques sur l’auscultation des poumons.

Préparation à l’analyse

Si les expectorations sont suffisamment formées, une préparation spéciale n’est pas nécessaire. Si la décharge est maigre, la préparation principale pour une analyse générale des expectorations est une boisson chaude, le thé au lait est le meilleur. En consultation avec le médecin, des expectorants peuvent être utilisés.

La veille de l’analyse, il est utile de boire 2 à 3 verres d’eau propre afin d’augmenter légèrement la quantité de décharge.

Il est nécessaire d’informer le médecin traitant ou l’assistant de laboratoire du nom et de la dose de tous les médicaments, s’ils sont pris quotidiennement ou occasionnellement peu avant l’étude.

Comment prélever des crachats pour analyse

Les crachats pour analyse générale sont recueillis dans un récipient stérile. Cela devrait être fait le matin, avant les repas. Vous devez vous laver, vous brosser les dents et bien vous rincer la bouche. Le matériel est collecté pendant le processus de toux.

3-5 ml suffisent pour la recherche. Il est important de collecter exactement l’écoulement des bronches et des poumons, et non du nasopharynx. La collecte correcte des crachats pour l’analyse générale est un événement important.

Le matériel biologique est livré dans les 3 heures et avant cela, il est stocké au réfrigérateur dans un récipient fermé.

Décryptage de l’analyse générale des crachats

L’analyse générale des expectorations montre le type de maladie respiratoire d’une personne. Le médecin traitant décrypte les résultats de l’étude, qui prend en compte toutes les caractéristiques de l’état du patient. Les paramètres suivants sont évalués :

  • la nature de la décharge pathologique;
  • cohérence;
  • le volume;
  • coloration des couleurs et degré de transparence ;
  • sentir;
  • inclusions pathologiques.

Lors de l’examen microscopique, les éléments cellulaires, les fibres présentes et les structures cristallines sont également examinés. Dans certains cas, une coloration supplémentaire est utilisée lorsque les expectorations sont colorées pendant l’analyse pour détecter les leucocytes éosinophiles ou les cellules qui apparaissent dans l’asthme bronchique et les allergies.

Vous pouvez faire un test d’expectoration sans rendez-vous tous les jours :

  • Du lundi au samedi : de 08h30 à 13h00 (première prise en charge), de 13h00 à 17h00 (deuxième prise en charge)
  • Dim : 09h30-14h00.

Pour recevoir les résultats des tests par e-mail, vous devez laisser un consentement écrit à envoyer par les administrateurs du centre médical.

Tests pour la tuberculose

Les expectorations du patient sont un mélange de sécrétion des glandes de la membrane muqueuse de la trachée et des bronches, d’épanchement séreux de vaisseaux pathologiquement altérés, parfois de particules de masses caséeuses, de granulation nécrotique et de tissu pulmonaire, ainsi que d’impuretés salines. Les expectorations sont sécrétées dans de nombreuses maladies des poumons et des bronches.

Dans les établissements antituberculeux, les patients recueillent les crachats dans des récipients individuels, un quart du récipient est rempli d’une solution de chloramine, où il est partiellement désinfecté. Les récipients sont gradués, ce qui permet de déterminer la quantité quotidienne de crachats.

Macroscopiquement, chez les patients atteints de tuberculose pulmonaire, les expectorations ont un caractère muqueux ou mucopurulent, inodore, homogène, ne forme pas de couches. La quantité de crachats peut varier. Au début de la tuberculose pulmonaire, les expectorations ne sont pas excrétées, puis elles peuvent être excrétées le matin par crachats séparés, plus tard leur quantité peut atteindre 100-200 ml.

Après examen macroscopique, un examen bactérioscopique, bactériologique et biologique des crachats est effectué.

Méthode bactérioscopique

La méthode bactérioscopique couvre la bactérioscopie directe de frottis de matériel pathologique coloré selon Ziehl-Neelsen, la bactérioscopie par flottation, la microscopie luminescente, la microscopie à contraste de phase.

L’examen bactérioscopique des crachats commence par la préparation d’un frottis. Pour ce faire, les crachats sont mélangés à une solution d’hydroxyde de sodium et centrifugés pour obtenir un sédiment. Le précipité est transféré sur une lame de verre avec des tiges de verre. La deuxième lame de verre est placée uniformément : recouverte d’un couvercle en verre. Le médicament est examiné au microscope. Vous pouvez y voir des leucocytes, des fibres élastiques et, avec une coloration spéciale, des cellules atypiques et diverses bactéries.

Coloration des mycobactéries positive pour Gram. Pour détecter le MBT, un frottis d’expectoration est préparé, séché, fixé sur la flamme d’une lampe à alcool, puis coloré selon Ziehl-Neelsen. La coloration se fait d’abord avec une solution phénolique de fuchsine. Mycobacterium tuberculosis ne perçoit pas bien la couleur, par conséquent, une solution de fuchsine est appliquée à la préparation en grande quantité, chauffée sur la flamme d’une lampe à alcool jusqu’à ce que de la vapeur apparaisse. Puis la peinture est essorée, la préparation est lavée à l’eau et décolorée dans une solution d’acide sulfurique à 5% ou dans un mélange d’alcool éthylique et d’une solution d’acide chlorhydrique. Dans le même temps, toutes les bactéries et tous les éléments morphologiques des expectorations, à l’exception de Mycobacterium tuberculosis, sont incolores. Le frottis est lavé à l’eau courante, puis du bleu de méthylène est appliqué pendant 1 à 2 minutes. Après cela, la solution de peinture est drainée, le frottis est lavé et séché. La préparation est étudiée grâce à un système de microscope à immersion, pour lequel une goutte d’huile à immersion est appliquée sur la préparation afin de créer le même environnement entre l’objectif et la préparation. Mycobacterium tuberculosis sous le microscope peut être vu coloré en rouge.

La méthode de coloration de Ziel-Neelsen permet d’identifier Mycobacterium tuberculosis dans les cas où 1 cm3 de crachat contient environ 5 000 à 10 000 MBT, à condition que 300 champs de vision soient visualisés. Avec une petite quantité de MBT dans les expectorations, la méthode bactérioscopique est inefficace.

L’examen des expectorations doit être effectué pendant trois jours consécutifs et, si le résultat est négatif, la méthode de flottation doit être utilisée.

Méthode de flottation

Il est basé sur le fait qu’en secouant deux liquides de densité différente, il est plus facile pour le liquide de flotter à la surface simultanément avec Mycobacterium tuberculosis en suspension. L’essence de la technique est qu’une suspension aqueuse est préparée avec des hydrocarbures (xylène, benzène) et du MBT. Une mousse crémeuse avec MBT coulera à la surface de l’eau, qui est aspirée avec une pipette et appliquée sur une lame de verre. La couche de mousse sur la lame de verre est séchée et une nouvelle couche de mousse est appliquée à partir du flacon. Ainsi, la mousse est superposée 5 à 6 fois, après quoi le frottis est fixé et coloré selon Ziehl-Neelsen.

Microscopie fluorescente

La microscopie à fluorescence est une méthode efficace pour détecter Mycobacterium tuberculosis. L’essence de la méthode réside dans la capacité de Mycobacterium tuberculosis, coloré avec des colorants spéciaux (auramine, rhodamine), à ​​briller lorsqu’il est irradié par des rayons ultraviolets. L’avantage de la méthode de microscopie luminescente est la possibilité d’effectuer des recherches à des grossissements inférieurs du microscope, ce qui permet de visualiser en peu de temps un plus grand nombre de champs de vision qu’avec la microscopie conventionnelle. La possibilité de détecter Mycobacterium tuberculosis augmente de 10 à 15 % par rapport à la bactérioscopie conventionnelle et de 8 % par rapport à la méthode de flottation.

Utilisez un microscope à fluorescence à faible grossissement. Sur un fond sombre, Mycobacterium tuberculosis jaune doré est visible.

Microscopie à contraste de phase

C’est la seule méthode de recherche microscopique qui permet d’observer les mycobactéries et leurs formes biologiquement modifiées à l’état vivant. Pour mener une telle étude, un dispositif spécial à contraste de phase est utilisé.

L’examen cytologique des expectorations chez les patients atteints de tuberculose pulmonaire révèle un petit nombre de neutrophiles au stade de dégénérescence importante sur fond de détritus caséeux, d’accumulation de cellules mononucléaires, de cellules géantes de Pirogov-Langhans et parfois d’éosinophiles.

Dans les cas où il n’y a pas d’expectorations ou si elles sont excrétées en très petite quantité, on prescrit au patient un mélange expectorant ou des inhalations irritantes. De plus, dans les cas où il n’y a pas d’expectorations, un lavage bronchique est examiné.

Enquête sur les bouffées vasomotrices des bronches

Elle est pratiquée par un médecin. Pour ce faire, le patient à jeun est lubrifié avec la racine de la langue, la paroi arrière du pharynx et l’épiglotte avec une solution à 1% de dicaïne. Ensuite, avec une seringue laryngée, 5 à 10 ml de solution isotonique de chlorure de sodium sont versés dans la trachée. Le patient développe immédiatement une forte toux et une solution isotonique de chlorure de sodium est introduite et crachée sur une boîte de Pétri. De plus, un lavage bronchique (BAS – lavage bronchoalvéolaire) est obtenu à l’aide de BAL – lavage broncho-alvéolaire, qui est effectué pendant la bronchoscopie. Le BAZ est examiné par la méthode de flottation ou par la méthode d’ensemencement. L’étude des bouffées vasomotrices bronchiques permet une détection supplémentaire du MBT dans 5 à 10% des cas.

Examen de l’urine, des matières fécales, du liquide céphalo-rachidien et pleural pour MBT

Dans la pratique clinique, le MBT doit souvent se manifester dans l’urine, les matières fécales, le liquide céphalo-rachidien et pleural. Un test d’urine pour MBT est effectué dans les cas où, lors de l’étude du sédiment, au moins 15 leucocytes sont trouvés dans chaque champ de vision.

Pour détecter le MBT, l’urine est centrifugée à plusieurs reprises, en superposant à chaque fois de nouvelles portions du sédiment d’urine sur une lame de verre. Le frottis est coloré selon la méthode Diehl-Neelsen. La détection de Mycobacterium tuberculosis dans l’urine indique la présence d’une tuberculose rénale.

Pour étudier l’urine selon la méthode de flottation, laissez-la reposer, puis 20 à 30 ml de sédiment sont traités, comme d’habitude, sans chauffage au bain-marie. L’absence de MBT dans les urines purulentes n’exclut pas la présence d’une tuberculose rénale. Dans de tels cas, il faut soit l’ensemencer sur des milieux nutritifs, soit appliquer la méthode de recherche biologique.

Une étude des matières fécales pour MBT doit être réalisée en cas de suspicion de tuberculose intestinale. Dans le même temps, il faut se rappeler que chez les patients qui sécrètent du MBT et avalent partiellement des expectorations, le MBT peut être détecté en examinant les matières fécales et les intestins non affectés, car Mycobacterium tuberculosis est résistant et ne meurt pas toujours sous l’influence des sucs digestifs. Dans les matières fécales des patients atteints de tuberculose, les intestins contiennent souvent du mucus, du sang et des impuretés de pus.

La détection de MBT dans le liquide céphalo-rachidien est souvent d’une importance décisive dans le diagnostic de la méningite tuberculeuse. Cependant, la méthode bactérioscopique ne peut détecter le MBT que chez 10 à 20% des patients atteints de méningite tuberculeuse. L’étude est réalisée selon la méthodologie suivante. Un tube à essai contenant du liquide céphalo-rachidien est placé pendant 8 à 10 heures dans un endroit frais. Si un film de fibrine délicat s’y forme (il est constitué de cellules et de MBT), il est appliqué sur une lame de verre et une préparation est préparée selon la méthode de Ziehl-Neelsen. Dans les cas où le film n’est pas formé, le médicament est préparé à partir du sédiment après centrifugation.

Pour détecter le MBT dans l’exsudat pleural, les ponctions et les écoulements de fistules, une préparation est préparée de la même manière que dans l’étude des expectorations.

Une étude bactériologique consiste en l’inoculation du matériel sur des milieux nutritifs et la différenciation de la culture MBT des saprophytes acido-résistants. Cette méthode peut détecter Mycobacterium tuberculosis, lorsque 1 ml du matériau contient 20 à 100 cellules microbiennes. Les éprouvettes contenant le milieu sont placées dans un thermostat à une température de 37°C. Les premières colonies de mycobactéries peuvent apparaître au 18-30ème jour, et parfois après 2-3 mois. L’examen bactériologique est effectué simultanément avec bactérioscopique trois fois.

L’inoculation du matériel d’essai est effectuée sur des milieux spéciaux après prétraitement. Les milieux les plus couramment utilisés sont : Levenshtein-Jensen, Finn-2, Middlebrook, Ogawa, etc., qui contiennent des substances qui inhibent la croissance de micro-organismes étrangers. Le traitement préliminaire du matériel pathologique consiste en la destruction de la flore bactérienne qui l’accompagne. L’ensemencement du matériel provenant des bronches, ainsi que l’ensemencement de l’urine, se fait à partir d’un centrifugeur ou d’un sédiment. Dans le même temps, l’urine, si elle n’est pas contaminée, ne peut pas être traitée.

Prétraitement du matériel biologique

Plusieurs méthodes de prétraitement existent pour préparer la culture des expectorations, de l’exsudat pleural et du liquide céphalo-rachidien.

La méthode Mazur consiste à traiter le matériel pathologique avec 3-4 ml d’une solution d’acide sulfurique à 2% dans un tube à essai stérile. Le tube est secoué pendant 3 minutes, après quoi le matériau est appliqué sur le milieu d’œuf avec une boucle de platine stérile.

Méthode de Petrov : les crachats sont traités avec une solution d’hydroxyde de sodium à 4 % pendant 15 minutes puis centrifugés.

méthode biologique

Il s’agit de l’inoculation de matériel pathologique à des animaux. Des cobayes ou des souris blanches sont injectés avec le matériel d’essai à une dose de 2-3 ml dans la région inguinale ou dans la cavité abdominale. Pour ce faire, il est d’abord traité avec une solution à 3-8% d’acide chlorhydrique, bien lavé (sinon une nécrose tissulaire peut survenir au site d’injection, même la mort de l’animal par exposition à l’acide est possible).

L’urine et le LCR non contaminés peuvent être inoculés sans prétraitement. En présence de souches MBT virulentes dans le matériel pathologique, l’animal contracte la tuberculose et meurt 1 à 2 mois après l’infection. Si les masses MBT ont une virulence affaiblie, l’animal meurt plus tard ou peut ne pas mourir du tout. Dans de tels cas, l’animal est abattu et le diagnostic est établi après une autopsie, une détection macro et microscopique des tubercules tuberculeux. Le diagnostic peut être posé sur la base de l’examen intravital d’un ganglion lymphatique régional élargi ou d’un infiltrat apparu au site d’inoculation de matériel pathologique.

Ces dernières années, pour la différenciation des mycobactéries, la méthode de chromatographie gaz-liquide a été utilisée, basée sur la capacité élevée de divers composés (acides aminés, acides nucléiques, graisses, glucides, etc.). Ceci n’exclut pas le stade de culture de l’agent pathogène sur milieu nutritif, qui peut être attribué aux inconvénients de la méthode.

Méthodes accélérées de recherche de mycobactéries

Les méthodes accélérées de détection des mycobactéries comprennent la détection du MBT à l’aide d’un tube indicateur BBL MOIT. La croissance de Mycobacterium tuberculosis se produit dans les 4 à 10 jours. Les tubes BBL MOIT contiennent du bouillon et un composé fluorescent qui réagit à l’oxygène dissous dans le bouillon. La concentration initiale d’oxygène ne donne pas une lueur brillante. Lorsque l’oxygène est absorbé par la culture MBT, une fluorescence brillante est observée au fond du tube. Ce résultat est considéré comme positif. S’il n’y a pas de fluorescence ou si elle est insignifiante, le résultat est négatif. Les lectures des éprouvettes sont prises en compte quotidiennement, à partir du deuxième jour d’incubation.

Récemment, les méthodes ELISA et de génétique moléculaire ont été utilisées pour diagnostiquer la tuberculose.

Méthodes génétiques moléculaires

Des méthodes d’identification de MBT utilisant des anticorps monoclonaux obtenus par la technologie des hybridomes sont apparues. Il existe maintenant plus de 100 anticorps monoclonaux dirigés contre les épitopes des principaux antigènes MBT. L’utilisation de ces anticorps dans le dosage immunoenzymatique permet de différencier très rapidement le type d’agent pathogène, mais jusqu’à présent la méthode est utilisée dans le développement scientifique pour identifier l’agent causal de la tuberculose, qui est le plus courant.

Parmi les méthodes de génétique moléculaire pour le diagnostic de la tuberculose, la méthode des sondes ADN et de la réaction en chaîne par polymérase (PCR) est la plus souvent utilisée. Ces méthodes reposent sur le principe de complémentarité des bases nucléotidiques dans la construction d’une molécule d’ADN double brin. Lors du sondage ADN, si l’échantillon contient une région spécifique de l’ADN de la mycobactérie à l’étude, un hybride (fragment double brin) de l’ADN du test et de la sonde ADN se forme.

La base du principe de la PCR est l’augmentation multiple d’un fragment d’ADN. L’amplification (doublement multiple du gène bactérien) nécessite la présence de deux amorces (graines) – un petit fragment d’ADN simple brin qui se connecte à la région complémentaire de l’une des chaînes d’ADN matrice. Par la suite, cette chaîne est complétée par l’ADN polymérase. Une augmentation de la quantité (de 106 fois) du fragment amplifié s’avère être une électrophorèse en gel d’agar. La comptabilisation des résultats des réactions est effectuée sous les plaques du transilluminateur en lumière ultraviolette,

Le sondage ADN permet de déterminer les mycobactéries dans le matériel de diagnostic en 2 à 4 jours et la PCR – pendant 4 à 6 heures avec la plus grande sensibilité des méthodes – 10-100-1000 cellules dans l’échantillon à tester.

Diagnostic différentiel de la maladie

La pneumonie est une maladie pulmonaire inflammatoire qui peut être d’origine bactérienne, virale ou fongique. Pour la sélection d’un traitement adéquat, il est nécessaire d’établir correctement et en temps opportun le diagnostic.

Dans certains cas, les symptômes de la pneumonie peuvent coïncider avec d’autres maladies respiratoires, mais les méthodes de traitement seront différentes. Dans ce cas, le médecin doit effectuer un diagnostic différentiel pour clarifier le diagnostic. Pour obtenir un examen qualitatif, il est recommandé de contacter l’hôpital Yusupov.

Tableau des excitatrices

Le diagnostic différentiel de la pneumonie vous permet de diagnostiquer avec précision la nomination du traitement nécessaire. Lors du choix des médicaments, la cause du développement de la maladie doit être prise en compte. Vous trouverez ci-dessous un tableau avec les principaux agents responsables de la pneumonie et comment ils se manifestent :

  • augmentation de la température corporelle jusqu’à 38-40°C;
  • toux avec crachats jaunes.
  • mal de gorge;
  • température corporelle subfébrile.
  • syndrome d’intoxication prononcé;
  • douleur thoracique;
  • augmentation de la température corporelle jusqu’à 38-40°C;
  • toux fréquente avec respiration sifflante;
  • des ganglions lymphatiques enflés;
  • fluctuations de la température corporelle au cours de la journée.
  • fluctuations de la température corporelle.

Diagnostic différentiel de la pneumonie communautaire

La pneumonie communautaire est une maladie survenue en dehors d’un établissement médical (synonyme : ambulatoire, domicile). C’est une pathologie très grave des poumons et peut être mortelle. Il est donc important de commencer le traitement le plus tôt possible. L’efficacité du traitement dépendra du diagnostic correct.

Le diagnostic différentiel vise à comparer les maladies selon certains critères (symptômes, résultats de recherche) et à exclure les maladies inappropriées pour obtenir le seul diagnostic correct. Avec la pneumonie, le diagnostic différentiel aidera à exclure les maladies suivantes:

Ils présentent un tableau clinique similaire au début de la maladie.

Diagnostic différentiel de la pneumonie et de la tuberculose

Le plus souvent, des erreurs de diagnostic sont commises lors de la comparaison de la pneumonie et de la tuberculose. Il est important de faire la distinction entre ces deux maladies, car les schémas thérapeutiques pour leur traitement varient considérablement. Les thérapies qui fonctionnent pour la pneumonie ne fonctionneront pas pour la tuberculose. De plus, la plupart des méthodes de physiothérapie pour la pneumonie ne peuvent pas être utilisées pour la tuberculose. Ceci est associé au risque d’aggravation de la condition.

Le diagnostic différentiel de la tuberculose pulmonaire et de la pneumonie à l’hôpital Yusupov est effectué à l’aide des derniers équipements de fabricants européens et américains. Les méthodes modernes de recherche par rayons X, bactériologiques et de laboratoire permettent aux médecins de la clinique d’établir rapidement un diagnostic précis et de prescrire un traitement adéquat.

Intoxication générale du corps

Toux sèche avec douleur

Présent, peut saigner

Pâleur de la peau

Dans la plupart des cas, il est négatif (montre très rarement un résultat positif, ce qui donne lieu à un diagnostic erroné)

Les ombres infiltrantes sont hétérogènes, il y a des foyers de décrocheurs

Effacer les ombres infiltrantes locales

Résultats de la recherche bactériologique

La tuberculose infiltrante est plus susceptible d’affecter les personnes en contact avec le patient ou à risque. La cause de la pneumonie est l’hypothermie, la pharyngite, la maladie des sinus paranasaux, la trachéobronchite. L’inflammation des poumons commence de manière aiguë, la tuberculose se caractérise par un début subaigu. Dans la tuberculose, l’intoxication est modérée, l’inflammation des poumons se produit avec un syndrome d’intoxication prononcé.

Avec la tuberculose infiltrante, la température corporelle est subfébrile, moins souvent fébrile, avec une alternance de valeurs élevées et normales. La pneumonie se manifeste par une température élevée de nature constante. La toux avec la tuberculose n’est pas intense et peu fréquente, avec la libération d’expectorations mucopurulentes. Un signe de pneumonie est une toux intense, principalement avec des expectorations purulentes.

Lors d’un test sanguin général chez des patients atteints de tuberculose, une augmentation modérée du nombre de leucocytes et de la vitesse de sédimentation des érythrocytes, souvent une lymphopénie et une monocytose, est déterminée. Avec la pneumonie, une leucocytose marquée et une vitesse de sédimentation érythrocytaire significativement augmentée sont notées. Mycobacterium tuberculosis se trouve dans les crachats des patients tuberculeux, et des micro-organismes Gram-positifs ou Gram-négatifs se trouvent dans les crachats des patients atteints de pneumonie. Sur les radiographies de patients atteints de tuberculose, les radiologues déterminent un assombrissement segmentaire ou polysegmentaire de nature hétérogène. Il est situé principalement dans les segments 1-2 et 6 du poumon. Dans la zone touchée ou les racines du poumon, des calcifications sont déterminées. Avec la pneumonie, un assombrissement uniforme est localisé dans les segments basaux des lobes moyen et inférieur du poumon.

Les manifestations cliniques et radiologiques des pneumonies et des tuberculoses et pneumonies pulmonaires infiltrantes présentent certaines caractéristiques, mais elles sont indirectes. Afin d’établir un diagnostic précis, les médecins de l’hôpital Yusupov mènent une étude bactériologique pour identifier l’agent causal d’une maladie infectieuse. Au cours de la bronchoscopie diagnostique, une biopsie est effectuée et le matériel est envoyé pour examen histologique. La tomodensitométrie permet également le diagnostic différentiel de la pneumonie et de la tuberculose pulmonaire.

Le tableau clinique et radiologique de la tuberculose pulmonaire et de la pneumonie ressemblera à ceci :

Forme clinique de la tuberculose pulmonaire

Inflammation exsudative broncholobulaire

Une ombre inhomogène, qui consiste à en fusionner de petites ou de grandes en un ou plusieurs composés, au centre desquels se révèle une cavité de désintégration

Tuberculose infiltrante limitée à 1 à 2 segments pulmonaires

Inflammation exsudative broncholobulaire confluente

Ombre inhomogène irrégulière ou arrondie, de faible intensité, avec des contours flous, ou une ombre inhomogène étendue avec la présence de cavités de désintégration simples ou multiples

Tuberculose infiltrante limitée à 1 à 2 lobes des poumons

Nécrose lobaire cheesy

Obscurcissement intense étendu qui s’étend à plus d’un lobe du poumon avec la présence d’une ou plusieurs cavités de décomposition

Causes d’erreurs dans le diagnostic différentiel

Dans 30% des cas, le diagnostic initialement établi de pneumonie n’est pas confirmé lors d’un examen plus approfondi des patients. 20% des patients atteints de tuberculose sont diagnostiqués au cours des 2-3 premières semaines de la maladie. Dans 80%, le diagnostic différentiel de la tuberculose et de la pneumonie est effectué pendant 1 à 3 mois.

Les principales causes d’erreurs de diagnostic sont :

  • antécédents de tuberculose mal recueillis ;
  • évaluation et interprétation incorrectes des manifestations cliniques de la tuberculose pulmonaire dans les conditions modernes;
  • interprétation incorrecte des changements radiologiques dans les poumons;
  • absence de contrôle radiologique après 7 à 10 jours de traitement de la pneumonie ;
  • absence ou examen unique des frottis d’expectoration pour Mycobacterium tuberculosis ;
  • effectuer une bronchoscopie d’enquête sans prélever de matériel de biopsie ;
  • comorbidités sévères.

Le plus souvent, les médecins commettent des erreurs de diagnostic en cas de pneumonie caséeuse et de tuberculose pulmonaire infiltrante.

Diagnostic différentiel de la pneumonie et de la bronchite obstructive

Les deux pathologies commencent le plus souvent par des maladies respiratoires aiguës. Dans la bronchite et la pneumonie obstructives, le principal symptôme est une toux avec expectoration. Cependant, la pneumonie est généralement plus grave: le patient présente une intoxication grave et une température corporelle élevée. Dans certains cas, la pneumonie chez un fumeur aura la même présentation clinique que la bronchite chronique du fumeur. Avec la bronchite obstructive, la température peut augmenter en 2-3 jours et ne dépasse pas les valeurs subfébriles. Lors du diagnostic différentiel, la nature de l’origine de la maladie est prise en compte: dans la pneumonie – principalement bactérienne, dans la bronchite obstructive – pulmonaire.

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